خط مشی دسترسیدرباره ما
ثبت نامثبت نام
راهنماراهنما
فارسی
ورودورود
صفحه اصلیصفحه اصلی
جستجوی مدارک
تمام متن
منابع دیجیتالی
رکورد قبلیرکورد بعدی
نوع مدرک : TF
زبان مدرک : فارسی
شماره رکورد : 66587
شماره مدرک : ‭پ۵۰۸۳‬
شماره راهنما : ع۱۴۸۷‬
سر شناسه : ‏صدیقی گیلده، مجتبی‏
عنوان اصلي : سنتز پلی اتیلن ایمین های با وزن مولکولی بالا اصلاح شده و ارزیابی ترانسفکشن نانوذرات حاصل از ان به منظور تهیه یک وکتور غیر ویروسی غیر سمی
نام عام مواد : [پایان‌نامه]
نام نخستين پديدآور : /مجتبی صدیقی گیلده
نام ساير پديدآوران : ؛استاد راهنما: محمد رمضانی، رضا کاظمی اسکویی
وضعيت نشر : دانشگاه علوم پزشکی مشهد: دانشکده داروسازی، ‭۱۳۹۰-۹۱‬
صفحه شمار : ‮‭[۱۰۹]‬ ص.‬: مصور
يادداشت : تاریخ دفاع:‭۹۱/۶/۱۹ ‬، نمره دفاع:‭۱۷/۷۵ ‬، خلاصه فارسی، خلاصه انگلیسی. عنوان به انگلیسی‭: Synthesis, characterizing and in-vitro transfection assay of modified high molecular weight polyethylenimine/DNA nanoparticles
يادداشت : چاپی
خلاصه يا چکيده : سنتز پلی اتیلن ایمین های با وزن مولکولی بالا اصلاح شده و ارزیابی ترانسفکشن نانوذرات حاصل از آن به منظور تهیه یک وکتور غیر ویروسی غیر سمی.خلاصه:ژن درمانی از موضوعات روز دنیا می باشد. براي آنكه DNA بعنوان دارو يا ابزار تحقيقاتي بكار رود، بايد كارايي Transfection مناسبي داشته باشد كه به دو عامل مهم كارايي انتقال (Delivery) ماده ژنتيكي به سلولها و كارايي بيان (expression)، بستگي مستقيم دارد. حامل‌هاي ويروسي كاراييTransfection در حد بالايي از خود نشان مي‌دهند. اما مشكلاتي از قبيل سميت، توجهات را بيشتر به سمت حاملهاي غيرويروسي خصوصاً، پلي‌اتيلن ايمين (PEI) جلب شده است. ژن‌رساني با PEI به تنهايي، محدوديت و نقايص متعددي دارد كه رفع ‌آنها مي‌تواند منجر به ايجاد حامل مطلوب و كارآمد گردد و در اينجا ساختار PEI وزن بالا اصلاح؛ و مشتقاتي از آن تهيه مي‌شود كه انتظار مي‌رود كه با تسهيل فرار اندوزومي، باعث افزايش كارايي ترانسفكشن نيز شود. در این تحقیق پلی اتیلن ایمین با وزن مولکولی 750 کیلودالتون انتخاب شد و با شاخه دار کردن آن توسط مولکول های 6، 10 و 16 برموآلکانوییک اسید؛ درصدهای متفاوت 10 %،50% و100% از پوشش سنتز شد. با اصلاحات انجام شده در PEI، در مجموع با پوشاندن آمین های نوع اول در C/P های مختلف؛ ظرفیت بافری کم شد.در آزمون اتيديوم برمايد مشاهده شد که پليمر هاي با درصد پوشش 50 و 100 درصد توانستند در C/P هاي بالاي 5/2، بيشتر فشرده سازي را انجام دهند. سایز ذرات و پتانسیل زتا بررسی شد که در محدوده 160 تا 260 نانومتر ارزيابي شد. آمین های نوع اول پوشانده شده توسط TNBS تعیین مقدار گردید. نتایج ترانسفکشن و در پی آن انتقال ژن بهبود یافت و نشان از تاثیر زنجیره های هیدروفوب متصل شده به PEI750 kDa بود. در مجموع ترانسفکشن با درصد هاي پوشش 10 درصد و در C/P هاي 4و 6 بهتر ارزيابي شد. این در حالی بود که سمیت سلولی پلیمر های سنتز شده در کل نسبت به PEI اولیه بیشتر شده است. بخصوص در مورد پليمر هاي 6 کربنه در C/P=6 که درصد پايايي سلول تا حدود 30 درصد کاهش يافته بود . در مجموع با بهینه کردن ساختار PEI750 kDa می توان از آن به عنوان یک حامل جهت اهداف انتقال ژن استفاده نمود.
: Synthesis, characterizing and in-vitro transfection assay of modified high molecular weight polyethylenimine/DNA nanoparticles.AbstractIntroduction: Nowdays, gene therapy has become a topic which is incorporated in the titles of many research groups.Advancements in gene therapy mainly depend on the development of novel gene delivery systems with high transfection efficiency and low toxicity. Although viral vectors are considered efficient gene transfer agents, their broad application has been limited by toxicity, immunogenicity, mutagenesis and small gene carrying capacity. Non-viral vectors have many advantages over viral vectors in terms of safety and immunogenicity, but they suffer from low transfection efficiency. This situation has lead many researchers to improve the non-viral systems like cationic polymers by redesigning existing vectors.Polyethylenimine (PEI) is a cationic polymer with the ability to condense DNA into nanometric particles suitable for in vitro and in vivo gene transfer applications. To increase the transfection efficiency of PEI many modifications have been done up to now. In this study we designed modified PEI with hydrophobe carbon branchs to increase transfection efficiency.Methods: polyethylenimine with molecular weight of 750KDa was selected and grafted by 6,10 and 16-bromo alkane at various percentages 10 , 50 and 100.the obtained products were dialyzed against distill water(cut off: 25000Da).after purification and then freezdrying steps, the efficacy of the synthetic vectors was evaluated in terms of DNA condensation, buffering capacity, polyplex particle size, zeta potential, transfection efficiency and cytotoxicity assay in Neuro2-A cells. Results: The results of ethidium bromide exclusion assay indicated that these vectors can condense pDNA at moderate and high C/P ratios.particle size and zeta potential measurements demonstrated that modified PEI polyplexes were able to form nanoparticles in the size range 160-260 nm. According to the buffering capacity assay data, the buffering capacity was decreased with this modification Transfection studies showed acceptable results for the polymers synthesized. toxicity of this derivatives was increased due to hydrophobic modification.
توصیفگر : ژن رسانی
: حاملهای غیرویروسی
: پلی اتیلن ایمین وزن بالا
: ترانسفکشن
: ظرفیت بافری
: فراراندوزومی
: تست سمیت MTT
: بهینه سازی هیدروفوبیک
شناسه افزوده : ‏ رمضانی، محمد، استاد راهنما
: ‏ کاظمی اسکویی، رضا، استاد راهنما
 
 
 
(در صورت عدم وضوح تصویر اینجا را کلیک نمایید)